老师,我想做标准曲线验证一下扩增效率,知道rna的浓度,怎么换算成拷贝数,有人说起码要知道bp数,
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:数学作业 时间:2024/10/04 18:11:52
老师,我想做标准曲线验证一下扩增效率,知道rna的浓度,怎么换算成拷贝数,有人说起码要知道bp数,
我又不是做的质粒,就是提取标本的rna,然后想倍比稀释做一下曲线,这个bp又是谁的bp呢,ABI7300的标准品要输入拷贝数,我输入RNA的浓度可以吗
我又不是做的质粒,就是提取标本的rna,然后想倍比稀释做一下曲线,这个bp又是谁的bp呢,ABI7300的标准品要输入拷贝数,我输入RNA的浓度可以吗
你这个情况不需要知道拷贝数目.把样品等比例稀释,比如1:4,或者1:10. 至少做4-5个点.PCR后按照相对浓度和扩增的Ct值做曲线,就可以得到扩增效率了.
如果要知道拷贝数目,必须有已知浓度的含有该序列的质粒来作为批准品做标准曲线.
再问: 可是,老师,7300做曲线有一步需要输入浓度,我能直接输入RNA浓度吗单位是ng/ul,这个数值机器默认吗,平时看着他们都是输的拷贝数,如果扩增后根据ct值自己是不是也可以手工画曲线,我三种不同样本,但是检测同一个基因,每种标本还需要各自做曲线?
再答: 可以输入相对浓度,比如1, 0.5, 0.25。。。。 也可以根据CT值自己画曲线,用EXCEL 同一个基因只要做一次
如果要知道拷贝数目,必须有已知浓度的含有该序列的质粒来作为批准品做标准曲线.
再问: 可是,老师,7300做曲线有一步需要输入浓度,我能直接输入RNA浓度吗单位是ng/ul,这个数值机器默认吗,平时看着他们都是输的拷贝数,如果扩增后根据ct值自己是不是也可以手工画曲线,我三种不同样本,但是检测同一个基因,每种标本还需要各自做曲线?
再答: 可以输入相对浓度,比如1, 0.5, 0.25。。。。 也可以根据CT值自己画曲线,用EXCEL 同一个基因只要做一次
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