载体和目的基因分别经限制性酶切后,产生不同的3'突出粘性末端.设计实验方案,构建重组质粒.

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：综合作业时间：2024/06/30 20:17:37

方法非常多,列举一两个：
1.
不同的粘性末端不能相连.所以,如果要相连,就要去除不同的粘性末端,进行平末端相连.
粘末端变成平末端有两种方法：klenow酶的补平或者s1核酸酶的切平.
为了减少载体自连,可以用碱性磷酸酶处理载体.
最后将载体和目的基因链接,构建重组质粒.
2.
设计引物,自带酶切位点,扩增目的基因,直接改变目的基因的酶切位点,然后再用和载体相同的限制酶酶切目的基因,切出相同的粘性末端.
直接将酶切完成的目的基因和载体连接.

载体和目的基因分别经限制性酶切后,产生不同的3'突出粘性末端.设计实验方案,构建重组质粒. 为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切的图示把目的基因连接到质粒上构建重组质粒时该如何选择限制性内切酶?引物如何设计? dna连接酶可以把目的基因与载体的粘性末端的碱基粘合形成重组dna,为什么错? 1.在基因工程中,目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接是指什么? RT 已经获得了载体质粒和目的基因,把他们结合获得重组体的实验怎么做? 目的基因导入受体细胞是怎样进行的?如何防止目的基因与质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接?请可以用构建好的插入了目的基因的表达载体重组质粒做southern吗采用质粒载体克隆目的基因,请问如何准确筛选出带有目的基因的阳性克隆?实验方案和基本流程? DNA连接酶可把目的基因与载体的粘性末端的碱基黏合,形成重组DNA 这句话哪里错了基因工程当中,用相同的内切酶切割载体和目的基因是为了获得相同还是互补的粘性末端基因表达载体和重组质粒的区别