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如何检测cDNA我做RT-PCR想在PCR之前检测下我的cDNA看下逆转录有没有问题,请问高手如何检测,跑电泳可以吗,那

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/08 16:28:06
如何检测cDNA
我做RT-PCR想在PCR之前检测下我的cDNA看下逆转录有没有问题,请问高手如何检测,跑电泳可以吗,那么电泳条带应该是怎么样算是比较好的?
cDNA一般是不检测的,并且也不好检测,因为你的cDNA都是mRNA,电泳出来会是一条弥散的带.并且上样量需要较大才能看间.
需要检测的是提取的RNA,看是否28s和18s rRNA是否清晰、明显(二者位置分别在5kb和2kb处).最大rRNA亮度应为次大rRNA亮度的1.5-2.0倍,否则表示RNA样品的降解.出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解.
如果RNA抽提没有问题,那么RT产生的cDNA一般来说是不会出现问题的.