dh5a 表达GFP

只能先就标题的问题谈谈我的认识.后面的追问我了解得也不全面.1.两者的结果检测方法不同.GFP绿色荧光蛋白,很直观,能够直接检到荧光,在普通的细胞培养条件下都能够观察到,对细胞的生命活动和其他并行的实

只要没有整合到基因组DNA,转染进入的外源性DNA都会随着细胞分裂而被稀释.所以经过10天后表达肯定是会减弱的,这是正常现象.只有当外援DNA整合到基因组后,表达水平才能稳定

用这两个酶没问题,你要确定几件事：1目的基因和载体都切开了吗?特别是目的基因如果是PCR后直接酶切效率会较低；载体上两个酶切位点连在一起吗?2感受态的效率问题3转化过程对不对,如抗生素加的对不对再问：

一般流式细胞仪都有FITC通道,GFP可以用该通道来测量.用同一细胞系的转染了无GFP质粒的细胞做阴性对照,设置阈值.

绿色荧光蛋白RTE1融合蛋白是本地化的高尔基体和乙烯不敏感的原因.在设法确定亚细胞定位的RTE1蛋白质,每个RTE1N和C端融合的绿色荧光蛋白和ectopically表示控制下的本土RTE1或35S启

不可以的

（1）由于图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是-TCGA-，因而M端是限制酶HindⅢ剪切形成的黏性末端，N端伸出的核苷酸的碱基序列是-TGCA-，因而N端是限制酶PstⅠ剪切形成的黏性末端．（2

D本题主要考查蛋白质、氨基酸等知识。蛋白质中不可能含有稀有气体元素(Ne)，A错；向蛋白质中滴加AgNO3溶液会使蛋白质变性，再加蒸馏水蛋白质不能重新溶解，B错；蛋白质是氨基酸通过缩聚反应得到的，C错

1,载体是否有问题?gfp连接方向?启动子是否匹配?2,没转进去?或者转进去之后没表达?3,荧光显微镜设置是否妥当?

（1）从图示可知，GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是TTCGA，是限制酶HindⅢ酶的切割位点；N端伸出的核苷酸的碱基序列是CTGCA，是限制酶PstⅠ切割位点；则在构建含该GFP的重组质粒A时，应

(1)HindIII和PstⅠ   Ti质粒(2)2(3)目的基因   标记基因(4)核移植  胚胎移植

GFP,即绿色荧光蛋白（GreenFluorescentProtein)2001年1月11日,美国科学家宣布培育成世界上首只转基因猴,这是世界上首次培育成功转基因灵长类动物.添加在这只名为"安迪"的猴

可以,只要你的PCR扩增特异性够强,没有杂带.这其实就是理论和实际的差距,因为表达载体的扩增效率低,如果一次实验不成功,你还要从PCR步骤做起重新收集DNA,而如果克隆至扩增载体,每次只需扩增质粒回收

BL21是蛋白酶缺陷株,表达蛋白后不会被降解~所以一般来表达~还有就是BL21生长要比DH5a快~DH5a则是复制会比较稳定,所以常常用来转化智力、制作核酸疫苗~麻烦采纳,谢谢!

PCR扩增人体骨髓间充质干细胞特异表达的基因的完整cDNA,和GFP融合.用那种载体要看你的转化方法了.

gfp:联合呼吁程序

可能是里面有带抗性的质粒,但是这个质粒上并没有插入你要的片段哦

GFP本身是绿色荧光蛋白(GreenFluorecentprotein)的缩写,至于你说的大肠杆菌GFP是个菌,要么是可以表达绿色荧光蛋白的大肠杆菌重组菌,要么是你把蛋白和菌搞混了.筛选氨苄青霉素抗性

荧光强度呗再问：具体怎么做？用什么仪器测啊？再答：荧光显微镜拍照然后拿软件统计下荧光强度就可以啦imageJ就可以吧再问：谢谢您的回答，我这么做过，但总觉得数据不可靠，细微差距比较不出来，不过现在看来

选DD是复制原点,不能作为报告基因.A半乳糖苷酶基因；B绿色荧光蛋白基因；C氨苄青霉素抗性基因这三个,都可以作为报告基因.