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能不能用PCR直接扩增目的片段,然后转入表达载体,代替在克隆载体或dh5a中的扩增

来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：生物作业 时间：2024/07/03 12:05:55
能不能用PCR直接扩增目的片段,然后转入表达载体,代替在克隆载体或dh5a中的扩增
可以,只要你的PCR扩增特异性够强,没有杂带.这其实就是理论和实际的差距,因为表达载体的扩增效率低,如果一次实验不成功,你还要从PCR步骤做起重新收集DNA,而如果克隆至扩增载体,每次只需扩增质粒回收DNA即可.
能不能用PCR直接扩增目的片段,然后转入表达载体,代替在克隆载体或dh5a中的扩增 为什么pcr扩增后不直接进入表达载体,而要经过克隆载体呢?关键原因是什么呢? 进行PCR扩增时为什么要将目的基因连到载体上?直接对其进行扩增不行吗? PCR扩增后除目的带外还有几条杂带,只切目的带能连上克隆载体吗? PCR扩增出目的片段之后为什么要酶切?酶切下来的是目的片段和载体?然后再把它们连起来?很困惑. 目的基因与载体结合需要ATP吗,那用PCR技术扩增时需要吗 PCR扩增结果除掉载体序列后,为何出现多段目的基因? 有人找公司合成过目的基因吗?拿到克隆了目的基因的载体后,能否直接导入大肠杆菌中直接扩增? 如果将PCR扩增的X基因片段与克隆载体连接,并转化入宿主大肠杆菌中,写出技术路线（包括基因和载体的连接、转化和鉴定）和关 PCR扩增时,引物是否插入载体后再复制? 是否目的基因在PCR扩增时不用在引物中加入酶切位点,就可与pGEM-T载体连接?为什么? 基因工程为何要先构建克隆载体然后后构建表达载体能否在获得cDNA后直接连到表达载体上