DNA测浓度,但是电泳没有条带
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/23 12:14:57
那就是PCR的问题了,建议用新的试剂再试下,最好先把反应液,酶,引物按比例先配好,再取混合液加引物
会降解的吧不负责任建议:你把图片保存,然后全部回收,扔冰箱里明天再对应着看~~~~~或者你直接打电话给教授,网上用QQ之类的讨论也一样,反正都是电子图片
中间的是RNA
1)质粒上没有这两种酶的酶切位点(或操作失误,试验失败)2)质粒上只有一种酶的酶切位点或两个酶的位点非常接近(
这样看你的OD值是多少,太低的话跑胶不一定能看到条带.除此之外,还可以检查一下你跑胶过程中是不是有问题,比如说没有加EB,电泳方向是否正确,DNA样品过度稀释,凝胶成像系统有问题等等.
一般Marker中亮的条带是100ng,其他的条带是50ng.可以看到你回收之后的条带亮度估计在10ng~30ng左右,如果你的上样体积为10ul,则浓度应该是1ng~3ng/ul,这个浓度是很低的,
不排除是预染Marker质量又问题再问:marker没有问题,实验室其他人做实验就没有问题。因为我是独立出来的,所以实验过程和仪器与他们不是很相同再答:那建议你在适当延长一下转膜的时间吧,三、四个小时
可能有几个原因:一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?)二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是
一个可能原因,DNA结合了蛋白质,所以跑不出去.加loadingbuffer后加热(90度以上)一下再上样试试.另外一个原因,你的产物特别大(不一定是目标产物)再问:我做的是菌落PCR电泳检测结果,我
应该是DNA污染~你用DNase处理下RNA提取物再用EDTA终止DNase活性~在跑下看看~一般都是DNA污染~才会在那个位置~
首先,看你提取什么RNA,如果你提取血液里面的小RNA那没有条带是正常的,因为小RNA没有结合EB的结构,所以电泳你看不到什么东西.其次,如果你提取细胞总RNA的话,就可能如一楼的朋友回答的那样,但不
非特异性扩增优化下pcr条件在不行的话就重新设计引物
核酸电泳时使用的是EB染料吗?如果提取的样品中还有较多的RNA,RNA分子量较小,电泳时跑在前面,会结合较多的EB,影响DNA的观察,建议RNA酶37度消化30分钟.再问:用的goldview。再答:
我之前跑PCR也是1···我个人觉得你应该先从引物考虑虽然PCR受很多因素的影响但是引物和退火温度无疑是很重要的两个方面没出现引物二聚体只能说你设计的两端的引物没有错配啊等等你可以找有经验的师兄师姐帮
marker能看到吗?marker很清楚,电泳就没问题.说明没有DNA.可能提取失败,沉淀也许是盐.测测浓度吧,应该很低.看看提取程序是不是有问题.
RNA在提取过程中和保存期间非常容易被RNA酶降解,提取过程得非常小心,保存期间也得加RNA酶抑制剂,不知道紫外分光光度计检测时含量和纯度如何,及时被降解,也应该有拖尾才对,可能是浓度太低,建议加大上
开始我以为是退火温度问题,但是你说做了两次,第一次没有条带,第二次有一条没有,这说明你加样有问题,还有你为什么要同一个cDNA要做六个PCR呢?还是lz说的不清楚?同样的条件同样的样品没理由会六条中只
白色沉淀应该是蛋白质.你确定是rna?向楼上说的,做个吸光光度值,确定一下吧.你是用什么抽提的,会不会用成了水饱和酚?那样有可能抽的是rna~
能的.因为DGGE是部分变性,所以切胶回收后经过复性即可.根据你的酶切位点连接到载体上就可以送去测序了.不过有点奇怪为什么你想测序呢?
请问蛋白marker染出来没?如果maker都没染出来,加上考马斯亮蓝染色液重复使用的话,八成是染液出问题了,我就遇到过这样的情况,重新配下染色液,过滤后再染胶试试看.(前提是Loadingbuffe