用细菌通用引物扩增放线菌基因组进行菌种鉴定,只要PCR出现目的条带就能测序?

如果是用在原核上,没有多大的却别,但是如果用在真核上,cDNA扩增出来的产物就比DNA直接扩增出来的短.因为cDNA是RNA逆转录过来的,而DNA里面除了RNA上面相对的片段还有内含子的片段,在扩增的

放线菌既不属于细菌,也不属于真菌.再问：那属于什幺？是不是微生物不仅仅是细菌真菌病毒谢谢了再答：微生物的范围很大，有细菌、真菌、病毒、原生动物等。不仅仅是你说的那三类。

ATCG.原理就是体外环境模仿人体内环境,完成人体内的DNA复制,大概就这样.

这个很正常,引物本身的结构和模板的结合牢固程度,就会影响扩增的效率,导致扩增出来的片段亮度不同.

测序一般一个反应在700bp左右,也就是说一个引物可以支持700bp长度的片段的测序工作,你自己设计的一对引物就是正反两方向测,大概在1400bp.但是,一般测序公司测4kb的片段还是很容易的,因为只

FPrimer:5'-TTGTAAAAAAATTAAATTAA-3'RPrimer:5'-CATATTTTAATTAATATTTC-3'你这个序列AT含量太高,尤其是5'端A有7个连续重复,引物本身很

因为DNA聚合酶需要结合在双链区域,才能启动后续的脱氧核糖核苷酸的聚合作用.因此需要引物（PCR中是DNA,而生物体内是RNA）来构成双链区,从而使DNA聚合酶识别并结合,启动聚合作用.

150bp我是用你的引物blast,找到相应的匹配结果.尽管菌种不同,但是对于你的引物而言,有两组序列（JN562715.2；JQ010853.1）均显示PCR结果为150bp,所以你的片段长度很可能

cDNA和mRNA的序列是互补的,如果用两个引物,最后的两条DNA序列分别对应于mRNA和cDNA中的一段.由于引物方向从5‘至3’,所以两个引物对应于mRNA和cDNA中相应序列即可.

通用引物1492r/F27,pcr后去测序,因为测序软件的自身原因,测出来开头的序列是杂带不准确,如果需要16sRNA的全长,必须做TA克隆,就需要载体的问题了.如果你要求鉴定菌种只到属,完全可以用通

根据mRNA（真核的）设计的引物,一般如果用DNA做模板的话,那么会出现的情况会是以下几种.一是能扩增出条带,但目标条带比你要的条带要大,因为你会连同内含子一同扩增出来,所以片段会偏大.二是什么都扩增

V3区是在通用引物所扩增的序列的一部分.V3区引物的变异性相对于通用引物27F/1492R而言更高.

细菌、放线菌同属原核微生物：细胞核无核膜、核仁和真正的染色体；细胞质中缺乏线粒体、内质网等细胞器；核糖体为70S；酵母菌和丝状真菌同属真核微生物：细胞核有核膜、核仁和真正的染色体；细胞质有细胞器；核糖

用近代分子生物学手段研究的结果表明,放线菌是属于一类具有分支状菌丝体的细菌,革兰染色为阳性.

原因很多,你是否提到了DNA,可以将你跑的DNA直接跑胶看看,到底有没有条带；PCR扩增的程序有没有问题,或者引物是否有问题,可以找个对照DNA试试,相同扩增条件下,是否扩出条带,如果扩不出来就用可能

通用引物就是用这个引物能够扩增出所有这一类的物种中的这一段基因,也就是要么这个基因在很多物种中其相似性很高,基本是百分之百,该基因比较保守,在各物种中（比如你的COII在昆虫中）是一样的；另一种就是该

不用考虑.打分高即可.

如果引物序列,PCR体系,程序,以及所用的物种都和文献一样的话,可考虑两种情况：1.你所参考的文献真实度有待考量.2.你所提取的该物种DNA质量不好.需重新提纯.

这个比较麻烦,如果你想用RACE的方法,3'末端需要添加上像真核生物那样的polyA尾巴,而且你要克隆它的全基因序列,还要做5'RACE.RACE技术比较适合真核生物.如果你要克隆的基

“同一对引物可以扩增出不同基因；不同引物也可以扩增出相同基因?”“在基因诊断时,比如镰状细胞贫血是点突变,患者和正常人在突变点两侧的基因是一样的”　　这里混淆了基因和基因序列的概念.患者和正常人的基因