PCR扩增目的片段时,在第几个循环后才出现目的片段长度的双链DNA分子

不需要.加入的原料有dATP,没有ATP.

目的基因与载体结合需要ATP用PCR技术扩增时也需要用限制酶切割质粒时是切开一个裂口

这样就P不出来的啊要换模板的必须要比目的基因要长再问：谢谢。只能重新设计了。

冷却的时候才能使得引物和模板结合啊.这一步也叫退火.

第二次比如目的基因是300bps,母链DNA2000bpsforwardprimer从母链第25碱基开始由5'-3'开始复制,backwardprimer从第325由3'-5'开始反向复制.第一次复制

引物本来就是单链的.书上画成双链才怪.PCR所用的DNA聚合酶只能顺着已经存在的一小段DNA的尾巴来接着合成,它不会自己起头.引物就是这么一小段用来起头的DNA.DNA本身很长很长,我们扩增时,只能扩

引物的功能是作为核苷酸聚合的起始点,引导DNA的合成.能设定循环次数,及控制复制次数.PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度.一般的循环次数选在30～40次之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之

那要看你做什么用,如果下一步你要构建载体的话,就需要相应的酶切位点,以便下一步操作.如果不做就没必要了.再问：只是想送去测序...为什么可以直接连接呢？再答：那就没必要加酶切位点了，因为现在的聚合酶一

只要有目的基因的片段存在,无论是质粒还是基因组还是其他类型的DNA片段,都是可以的.

当然可以咯,不过我没明白为什么上游引物GCrich跟分两段扩增有什么关系,1.2K一次扩增是完全没有问题的,如果上游引物出现GCrich的情况,那么可以考虑在更加上游的地方设计引物啊,在这个基因外测的

没有必要纠结于这些概念目的基因,就是你要研究的那个基因.除非你要克隆基因全长,不然RT-PCR就是用来扩增一小段（所谓目的基因片段）再问：我想做rt-pcr但是我找了好长时间也没有找到：狗β3-ar引

我是ls小号,度娘审核答案你看这个图,不就是在一段DNA上截吗?就是说复制出的DNA双链中有的不是目的基因, 这句话我不太懂.在不考虑DNA外显子和内含子以及复制时出现的染色体变异等等情况下

可以,只要你的PCR扩增特异性够强,没有杂带.这其实就是理论和实际的差距,因为表达载体的扩增效率低,如果一次实验不成功,你还要从PCR步骤做起重新收集DNA,而如果克隆至扩增载体,每次只需扩增质粒回收

貌似没听说过,你的酶和dNTP买回来之后说明书上会给出你合适的体系,那个dNTP绝对都是足量的.

2个办法1.直接使用提纯试剂盒,去掉其他成分,或者跑胶后切胶提纯2.克隆到载体质粒,再进行其他操作

这个问题就比较难了高中如果考到这个算难题其实你只要一步一步推就能够解出解法：复制四次,共有16个DNA分子,其中只含引物A的DNA片段有1个,由母链和引物A形成,只含引物B的DNA片段也只有1个,由母

.PCR每分钟能扩增多长的片段和PCR仪没有关系,只和你PCR体系中的酶和buffer有关.再问：那到底每分钟能够扩增多少bp的片段啊再答：你看看你用的是什么酶，找找那酶的说明书，上面肯定写了再问：酶

PCR的反应在进行时,的确会产生不需要的片段.实际应用的时候,我们都会在需要的基因片段上染色或者标记萤光.由于价格上的原因,目前国外的实验室都采用染色的方法.而且随着反应的进行,由于大量引物的存在,需

应为PCR扩增出来的是混合物,酶切回收后才基本是纯的目的片段.载体一般不用PCR扩增,一般是质粒来源,也需要用切口一致的酶消化回收.之后连起来就好了再问：那PCR扩增出来的混合物里除了目的片段还有什么

连到载体后扩增有好处：载体相对于基因组或cDNA复杂度降低,扩增出的片段纯度比较高,而且循环数可以很低,如20-25循环切忌用载体扩增时用高循环,否则会有大量smear引物肯定需要加的!mg2+倒可以