设计一个实验,将猪脂肪沉积的某个基因在大肠杆菌中表达.
来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/10/04 14:41:39
设计一个实验,将猪脂肪沉积的某个基因在大肠杆菌中表达.
1.在猪身上采一块样品(耳朵),提取基因组.
2.在NCBI上查找相关基因的信息,设计引物.
3.以提取的基因组为模板,加入引物进行PCR反应.(要用taq酶)
4.将产物进行胶回收,回收目的片段.
5.将目的片段连入T载体.
6.将连接产物转化至感受态大肠杆菌中.
7.将感受态细胞涂布在氨苄抗性的平板上,放入37度恒温箱培养12-16小时.
8.挑取平板上的单克隆点,分别接入氨苄抗性的液体培养基中.
9.12小时后,用菌液为模板,之前设计的引物进行PCR,进行阳性鉴定.能P出目的片段的即为阳性克隆.
10.阳性克隆的菌即为表达了猪脂肪沉积基因的大肠杆菌.
2.在NCBI上查找相关基因的信息,设计引物.
3.以提取的基因组为模板,加入引物进行PCR反应.(要用taq酶)
4.将产物进行胶回收,回收目的片段.
5.将目的片段连入T载体.
6.将连接产物转化至感受态大肠杆菌中.
7.将感受态细胞涂布在氨苄抗性的平板上,放入37度恒温箱培养12-16小时.
8.挑取平板上的单克隆点,分别接入氨苄抗性的液体培养基中.
9.12小时后,用菌液为模板,之前设计的引物进行PCR,进行阳性鉴定.能P出目的片段的即为阳性克隆.
10.阳性克隆的菌即为表达了猪脂肪沉积基因的大肠杆菌.
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