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OD260反应的是溶液中核酸的浓度,D280反应的是溶液中蛋白质或者氨基酸的浓度.为什么?

来源:学生作业帮 编辑:作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/18 06:50:32
OD260反应的是溶液中核酸的浓度,D280反应的是溶液中蛋白质或者氨基酸的浓度.为什么?
蛋白中trp、tyr、phe的吸光度为280nm,所以280nm常用来表示蛋白质吸光度;而260nm为DNA的吸光度.
理论上,纯的RNA情况下:OD260/OD280的值为2,纯的DNA情况下:OD260/OD280的值为1.8.
  OD260反应的是溶液中核酸的浓度,D280反应的是溶液中蛋白质或者氨基酸的浓度.
样品中如果含有蛋白质及苯酚,A260/A280比值会明显下降.对于纯的样品只要读出260 nm 的A值即可以算出含量.通常以A值为1相当于50微克/ml 双螺旋DNA,或者40微克/ml 单链DNA(RNA),或者20微克/ml 寡核苷酸计算.
 OD260/OD280=1.2.0 RNA居多,纯度已经很高了.
纯DNA:OD260/OD280≈1.8(>1.9,表明有RNA污染;