PCR不能扩增出目的条带,用的是文献中提供的引物

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/07/07 09:23:08

PCR不能扩增出目的条带,用的是文献中提供的引物
总是扩增不出来,目的片段279bp,我用的条件是94℃,5min；94℃,30s,50℃,30s,72℃,45s,30个循环；72℃,5min.其中退火温度有试过56℃,58℃,都不行,只有引物二聚体.下过一段该序列基因,比对了一下,引物应该没啥问题

建议：
1、用引物在ncbi里去查,看看是否完全匹配,国外文献尚有错误,如果是国内的.；
2、不是提高退火温度,而是降低,看看是否有非特异性的产物；
3、有条件的话,建议找一个阳性对照,质粒最方便.如果没有这个基因的,可以找一个看家基因的,再合成一对引物,做阳性对照.检查整个体系中是否有问题.阳性对照和阴性对照是做PCR必须的,出了问题就容易判断了

PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 PCR中,PCV2的引物扩增后,跑电泳的条带在多少bp? 简并引物的pcr扩增我照文献报道的虾的一个基因的保守区的简并引物及其pcr的条件,试着扩增蟹的这种基因,死活扩不出条带. PCR产物测序问题.我用简并引物扩增未知基因.设计了几对引物.都出现了目的条带.发现其中两对引物的产物长度比较长.因为我我做的是分子鉴定真菌,用的是通用引物ITS1和ITS4,pcr扩增后只有marker有条带,其他的都没有是什么原因. 基因的PCR扩增实验扩增不出DNA条带是什么原因? PCR扩增不出来条带的原因? PCR扩增DNA的操作里为什么要用引物? PCR扩增时引物的位置 PCR目的条带的问题, 组织提取的cDNA和细胞提取的cDNA用同一引物PCR扩增出来的条带长度不一样,是什么原因?有什么方法改进吗 pcr扩增目的基因,为什么要先合成引物,直接用游离的核苷酸去聚合不可以吗?