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将某一基因进行重组表达,纯化重组蛋白制备抗体,用 Westen bIOt来 检测某一组织中该蛋白的

来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：生物作业 时间：2024/11/08 19:59:03
将某一基因进行重组表达,纯化重组蛋白制备抗体,用 Westen bIOt来 检测某一组织中该蛋白的
表达水平,出乎意料的是除了预计的蛋白条带外,还分别发现了分子量大于和小于预期分子量的
蛋白条带,请解释原因.
不知您做的是单抗还是多抗?百替生物认为,您的情况可能是由于抗体在细胞内的非特异性反应.另外,如果蛋白条带靠的非常紧,呈双带形式,那么很有可能您的蛋白产生了磷酸化的现象.如果分子量较大的蛋白的蛋白质量正好是预计蛋白的倍数的话,则应考虑该蛋白在体内是否存在比较难打开的单聚或者多聚形态.
再问： 磷酸化是什么引起的啊？不会导致分子量小的蛋白吧！
再答： 磷酸化是蛋白分子在细胞内的一种翻译后修饰。当细胞受到某种信号刺激时，处于该条信号通路上的蛋白可能会产生磷酸化，成为活性形式。当然，也有的蛋白本身在细胞内就以磷酸化的形式存在。 磷酸化的蛋白不会导致蛋白分子量变小。如果您的分子量较小的蛋白上有比较明显的拖带，那么则应考虑蛋白的泛素化修饰。
再问： 泛素话修饰？ 谢谢你哦！
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