（2013•扬州一模）下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关

来源：学生作业帮编辑：作业帮分类：生物作业时间：2024/11/06 06:58:44

（2013•扬州一模）下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题．
资料1：巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达，图中质粒上5′AOX1和3′AOXI（TT）分别是基因AOX1的启动子和终止子．
资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作运载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达．

资料3：限制酶切位点

限制酶	识别序列及酶切位点
SnaBⅠ
AcrⅡ
SacⅠ
BalⅡ

（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上______、______限制酶识别序列，这样设计的优点是______．
（2）酶切获取基因后，需用______将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌中，以获取______．
（3）步骤3中应选用限制酶______来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞．
（4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用______法进行检测．
（5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入______以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达．
（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是蛋白质合成后，细胞可以对其进行______并分泌到细胞外，便于提取．

（1）重组质粒上的目的基因若要表达，需要目的基因的首尾含有启动子和终止子．而SnaBⅠ、AvrⅡ识别的序列在启动子与终止子之间，只要在目的基因两侧A和B位置分别接上这两种序列，并用SnaBⅠ、AvrⅡ这两种内切酶对质粒和目的基因同时切割，便会各自出现相同的粘性末端，便于重组与表达，同时防止自身环化，因此在HBsAg基因两侧的A和B位置接上SnaBⅠ和AvrⅡ限制酶的识别序列．（2）①用DNA连接酶将切割后的HBsAg基因和pPIC9K质粒连接成重组质粒；②导入大肠杆菌体内，目的是利用大肠杆菌无性繁殖速度，短时间内可获取大量的重组质粒．
（3）重组DNA的两侧分别是启动子和终止子，除BglⅡ外，其它限制酶会破坏含有启动子、终止子的目的基因．
（4）用DNA分子杂交技术检测是否导入目的基因．
（5）资料1显示，甲醇为该酵母菌的唯一碳源，同时诱导HBsAg基因表达．
（6）酵母菌为真核生物，细胞内具有对分泌蛋白加工的内质网和高尔基体等细胞器，细菌等原核生物，不具有内质网和高尔基体等细胞器．
故答案为：
（1）SnaBⅠAvrⅡ避免质粒和目的基因自身环化（或任意连接）
（2）DNA连接酶　大量重组质粒
（3）BglⅡ
（4）DNA分子杂交
（5）甲醇
（6）加工（修饰）

（2013•扬州一模）下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关为了使酵母菌生产乙肝疫苗,为什么酵母菌中导入乙肝病毒抗原基因而不是乙肝病毒抗原! 为了使酵母菌生产乙肝疫苗,为什么酵母菌中导入乙肝病毒抗原基因,而不是抗原 1基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因在宿主细胞中稳定和高效的表达 2利用酵母菌生产乙肝疫苗时,应向酵母菌导入乙肝病毒下列有关基因控制生物性状的实例分析，属于直接通过控制结构蛋白合成来控制性状的是（　　）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌,从两者中生产的胰岛素在功能和什么序列上是相同的 RNA病毒是如何合成蛋白的将目的基因导入动物细胞用到的载体只能是病毒吗?质粒可以吗? （2013•扬州一模）科学家将豌豆染色体片段导入玉米细胞，培育出具有豌豆优良性状而染色体数目不变的玉米新品种．下列有关叙基因控制蛋白质合成的过程. 基因控制蛋白质合成的过程基因控制蛋白质的合成转录过程