构建重组质粒加抗性能长出来菌,但是提质粒发现大小不对,什么原因

我也思考很久没能找出问题的根源

选择性标记基因(抗生素抗性基因可以对质粒载体经行标记以便选择)

你需要的是理解:DNA是双链的吧.比如说左边一条是1的,右边的是2的.121212121212那么上下隔开1与1间就要用DNA聚合酶``连接单个链上的DNA片段左右1和2的就需要DNA连接酶```连接

再说一遍,PUC18携带氨苄青霉素抗性基因只能筛选转化子,没法筛选重组质粒!详细的说,就是氨苄霉素抗性只能筛选转入了质粒的菌,而这个质粒是否是重组的质粒是没办法筛选的!只能用其他方法,比如蓝白斑法才能

质粒不一定含有标记基因,但作为基因工程的质粒一般是有的,为的是检测方便啊；质粒是至少有一个限制酶切点的

分子水平上,用人工的方法提取（或者合成）不同的生物的遗传物质,在体外切割拼接和重新组合,然后通过不同方法把重组的DNA分子引入受体细胞,使外源DNA在受体细胞进行复制与表达,按人的需要生产不同的产物或

对呀如果将细胞涂在汗抗生素的板子上（或者培养基中）,不含抗性基因的细胞就会被杀死,如果细胞成功的转染了质粒,得到了那个抗性基因,那么就不会被杀死,这个是最常用的筛选方法

汉语歌词：《最天使》曲/词：曾轶可最好的那个天使我最熟悉的字是你的名字我们会有大大的房子你会送我一首小诗最坏的那个天使我最爱画的就是你的样子我们守着距离拉成的相思温柔着彼此的言辞我最爱的就是那个天使爱

抗性基因通过表达起作用.质粒上的抗性基因在细菌内转录出mRNA,然后翻译成蛋白质．这种蛋白质可以对某些抗生素有分解作用或改变了细菌本身的一些结构而使得细菌对某抗生素不敏感把细菌在含青霉素的培养基中涂板

你的构建策略很好,不需要用T载体.再问：为什么有的文章里面用到pMD18T这个载体呢？它是什么作用，我不太明白再答：　　pMD18T是个T载体。如果PCR产物直接双酶切效果不好，可以先把PCR产物放到

这个可以通过pcr等技术进行鉴定.抗性基因可以排除无抗性的菌或质粒载体,易于筛选

重组时选择你的目的基因上没有,而质粒的多克隆位点上有的酶切位点,一般重组质粒需要两个酶,所以你要选择两个酶切位点,注意尽量避免使用切出平末端的酶.重组引物设计时首先你要确定你选择的两个酶在的酶切位点在

是完全没有质粒还是质粒量很低?没有的话：染杂菌了.重新复苏保藏的菌种,或者划线分离,重新鉴定.或者重新转化.质粒丢失.表达菌株或者质粒上有特殊序列的话,很容易丢失质粒.换个菌种保藏.质粒量很低：菌种老

哈哈,我就是做这个的,因为基因直接克隆出来,酶切得不太好,而且也不容易连到PET上面,而PMD是克隆载体,上面添加了多聚T,PCR的产物末端通常会多P出几个多聚A,A和T互补,再用连接液连接,就非常容

筛选细胞的话是对的.但是转基因植物是不用标记基因筛选的,目的基因导入植物后,用分子杂交检验目的基因是否插入和表达,再将表达了的细胞（或组织）进行组织培养获得新植株.所以转基因植物是不用标记基因筛选的.

southern是检测你的目的基因是否转入受体即你的转基因植物中,在插入了目的基因的表达载体中应该可以检出你的目的基因,但这并不意味着你的目的基因就一定会成功的转入植物中.不知你转的是什么植物,如果你

方法非常多,列举一两个：1.不同的粘性末端不能相连.所以,如果要相连,就要去除不同的粘性末端,进行平末端相连.粘末端变成平末端有两种方法：klenow酶的补平或者s1核酸酶的切平.为了减少载体自连,可

以卡那霉素抗性基因Kanr为例,Kanr编码蛋白APH(3′)-Ⅱ对卡那霉素具有抗性,这样在筛选培养基上添加卡那霉素,能够存活下来的就是具有卡那霉素抗性基因的质粒.

用于筛选成功导入目的基因的质粒,以便将转入目的基因的质粒导入载体.

什么基因?什么质粒?正常情况不用这样做的一般做表达用的基因片段是需要测序鉴定的连T载体就是为了去测序,证实你扩增片段没有突变且是你需要的目的片段然后再去连接你的目的载体就ok了