质粒两条带,单酶切后一条带-搜答案-智慧作业帮

你模板是什么?

质粒转化应该比较容易,要检查一下引物对不对.其次是你的模板够不够,因为农杆菌中质粒拷贝数很低.可以提出质粒后再来PCR再问：嗯，载体上没有通用引物，我是用基因特异引物做的。摇菌时我要了24个小时呢，本

出现两条带是非常正常的现象.抗体的原因：不同厂家的抗体特异性会出现不同的差异,大部分都能检测到目的条带,但是有时能检测到非特异性的条带；蛋白亚型表达的原因：我做了大概两年半的WB,经常会发现,一种蛋白

质粒丢失是很常见的现象,质粒复制速度跟不上细菌分裂速度,质粒就会丢失.

中间的是RNA

如果PCR系统没有问题,很可能是质粒和染色体发生了重组.建议提细菌的genomeDNA做一次PCR.如果是阳性,就说明是这样.另外,还可以另挑几个菌落,重新提质粒扩增.

我觉得用elutionbuffer没太大的影响,如果你非要觉得不好的话,只能在转化一遍重新提质粒或者抽成干粉再加水.我们一般用水就行.实在不行去测序呀.提的质粒和空质粒可以比较,如果你插入的基因足够大

能确定菌液pcr出来的就是目的条带吗?如果确定,那就是可能质粒抽提和酶切这两步出了问题

1）质粒上没有这两种酶的酶切位点（或操作失误,试验失败）2）质粒上只有一种酶的酶切位点或两个酶的位点非常接近（

只要制备胶等过程都没问题,marker也跑出条带了,那这种情况最有可能的原因还是质粒的浓度过低.所以,虽然OD值可测出来,但胶显示不出来,我就遇到过这样的情况,还算很普通的现象.下次再加大菌量就行.再

别人给的质粒,第一要做的是转化保种啊,别人给那点哪够分析.转化完了自己抽质粒分析.质粒直接跑电泳理论上是三条带,要想分析建议做单酶切再电泳.再问：又做了一次，拿个质粒菌做阳性对照也都没有提出来。不知道

光线就是一条带箭头的线段，是为了描述方便和形象而认为引入的，并不是真实存在的．故答案为：光线．

erk1/2就表示erk1+erk2分子量分别42,44.也有的抗体只识别其中之一.一般情况下磷酸化不会导致蛋白分子量增加.具体看抗体说明书.CREB容易出两条带原因是CREB和另外一个蛋白同源性太高

诸葛亮征孟获--收收诸放放诸葛亮弹琴--计上心来诸葛亮挥泪斩马谡--顾全大局鹅毛扇诸葛亮的-神妙莫测诸葛亮借箭--有借无还诸葛亮要丑--不知诸葛亮三气周瑜--略施小技诸葛亮用兵--神出鬼没诸葛亮妻--

先说质粒电泳图.最上面发亮的是加样孔,下面最亮的是未降解的RNA,中间那条亮度最低的是质粒.几点建议:1一定要加marker,否则很难判断大小,2胶浓度应该再小一点,3跑得时间太短,4加些DNAsef

体系变化后会有些不同,但影响这么大,可能试剂没混匀,仪器孔加热不均一了,等等.如果25ul体系稳定,建议25ul就好.只是多P1管而已吧.

两层还是两条?两层是你的X光片移动造成的,两条嘛,可能是形成了二聚体,或者蛋白有修饰,或者蛋白被剪切,或者抗体识别其同源性高的蛋白了.

首先明确一个问题,你的这个酶切位点在这个质粒中是唯一的吗,也就是说你只想把这个质粒切开吗?看你的结果好象这种可能性大些,那样我觉得最有可能是梅切不完全,即切开的线形质粒会比未切开的质粒跑得慢但两条带很

切开了吧.质粒没切开前是超螺旋,在电泳中比有切口的开环质粒跑得快.

首先,你要确定你所切下来的目标条带的分子量大小.如果切下来的片段分子量小的话（小于1kb),经常会出现看不到的情况.因为从质粒上面切下来的片段摩尔数是和质粒一致的,在分子量很小的情况下,等摩尔数的小片