作业帮基因表达载体构建的原理和操作步骤
来源：学生作业帮 编辑：作业帮 分类：生物作业 时间：2024/11/05 21:40:26
基因表达载体构建的原理和操作步骤
转入基因的农杆菌算是基因表达载体吗?
转入基因的农杆菌算是基因表达载体吗?
先回答你的问题,转入外源基因的农杆菌不能较载体,它本身是外源基因的受体,携带外源基因的质粒或者噬菌体才是载体.
你想问基因表达载体的构建,这个问题太大,而且表达载体多种多样,用处也很多,所以很难一下子概况.我只能大概说一下：
原理：将外源基因片段与载体连接（载体通常选用质粒或者噬菌体或其他病毒）,将重组的载体转染受体细胞,使之整合入宿主基因组或者在稳定存在于胞质内,是宿主细胞能够表达载体上的外源基因,从而获得新性状或者新产物.
大概步骤：
1）从基因组或cDNA上克隆得到完整的目的基因（至少包含CDS区）,通常在两端加粘性末端或重组位点
2）选择合适的表达载体（真核、原核、噬菌体、某些病毒、标记等）
3）将克隆得到的目的基因与载体连接
4）将重组载体通过某种手段转入受体,即宿主中（化学转染、脂质体、电转、显微操作等）
5）筛选阳性的宿主细胞并扩繁
再问： 怎样将外源基因片段与载体连接，外源基因侵染噬菌体可以吗？
你想问基因表达载体的构建,这个问题太大,而且表达载体多种多样,用处也很多,所以很难一下子概况.我只能大概说一下：
原理：将外源基因片段与载体连接（载体通常选用质粒或者噬菌体或其他病毒）,将重组的载体转染受体细胞,使之整合入宿主基因组或者在稳定存在于胞质内,是宿主细胞能够表达载体上的外源基因,从而获得新性状或者新产物.
大概步骤：
1）从基因组或cDNA上克隆得到完整的目的基因（至少包含CDS区）,通常在两端加粘性末端或重组位点
2）选择合适的表达载体（真核、原核、噬菌体、某些病毒、标记等）
3）将克隆得到的目的基因与载体连接
4）将重组载体通过某种手段转入受体,即宿主中（化学转染、脂质体、电转、显微操作等）
5）筛选阳性的宿主细胞并扩繁
再问： 怎样将外源基因片段与载体连接，外源基因侵染噬菌体可以吗？